5301星形細胞培養(yǎng)基是一種專門用于星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)的無菌、液體培養(yǎng)基,通常包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胎牛血清、生長因子、抗生素等成分。
5301星形細胞培養(yǎng)基使用規(guī)范:
1.細胞接種
細胞密度:星形細胞接種密度根據(jù)細胞代次和狀態(tài)調(diào)整。
預處理:接種前用培養(yǎng)基預潤培養(yǎng)瓶/皿,避免細胞干燥損傷。
2.培養(yǎng)條件
溫度:37℃恒溫培養(yǎng)。
氣體環(huán)境:5%CO2(維持pH穩(wěn)定),部分星形細胞可能需要低氧條件。
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基,避免代謝產(chǎn)物積累導致細胞毒性。
3.傳代與凍存
消化方法:用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液輕柔消化,血清終止消化。
凍存:使用含10%DMSO的凍存培養(yǎng)基,程序降溫后轉(zhuǎn)入-80℃或液氮保存。
5301星形細胞培養(yǎng)基注意事項:
1.避免污染
操作前紫外線消毒超凈工作臺30分鐘,佩戴手套和口罩。
開封的培養(yǎng)基需在1個月內(nèi)用完,避免反復凍融(可分裝為單次用量)。
2.血清質(zhì)量控制
胎牛血清需經(jīng)過檢測(如支原體、病毒、內(nèi)毒素),熱滅活可滅活補體成分。
不同批次血清可能影響細胞狀態(tài),建議批量采購并測試。
3.生長因子保存
bFGF/EGF需分裝為小劑量,-20℃保存,避免反復凍融失效。
4.特殊需求調(diào)整
原代細胞培養(yǎng):可能需要添加更高濃度血清或基質(zhì)包被。
分化誘導:去除生長因子并添加低血清可誘導星形細胞分化。
